實(shí)驗室離心機主要是應用于血液的分離、病毒的研究、DNA的研究、藥品的提純,對溶液中密度不同的粒子進(jìn)行分離,是放射免疫、生物化學(xué)、農林科學(xué)等生產(chǎn)和科研單位的理想設備。但是我們實(shí)驗室離心機對于不同的樣品分離,離心分離法各不相同,適合的場(chǎng)合也盡不相同。下面小編簡(jiǎn)單介紹一下實(shí)驗室離心機常見(jiàn)的幾種離心分離法,如下所示:
①梯度離心法
密度梯度離心法是將樣品加在離心管中預先增加梯度介質(zhì)中進(jìn)行速度沉降或沉降平衡,在一定的離心力下把顆粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。
密度梯度離心法常用的介質(zhì)為氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。
圖3
優(yōu)點(diǎn):具有良好的分辨率,分離效果好;顆粒不會(huì )積壓變形,能保持顆?;钚?,并防止已形成的區帶由于對流而引起混合;適應范圍廣,即能分離具有沉降系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度的顆粒。
缺點(diǎn):樣品濃度不能太高;達到平衡時(shí)間長(cháng)。
②分析性超速離心法
分析性超離心法主要是為了研究生物大分子的沉降特性和結構,而不是專(zhuān)門(mén)收集某一特定組份。因此它使用了特殊的轉子和檢測手段,以便連續監視物質(zhì)在一個(gè)離心場(chǎng)中的沉降過(guò)程。分析性超速離心機主要由一個(gè)橢圓形的轉子、一套真空系統和一套光學(xué)系統所組成。該轉子通過(guò)一個(gè)柔性的軸聯(lián)接成一個(gè)高速的驅動(dòng)裝置,此軸可使轉子在旋轉時(shí)形成自己的軸。
圖4
優(yōu)點(diǎn):加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。
缺點(diǎn):需要利用離心機產(chǎn)生強大的離心力,才能迫使這些微??朔U散產(chǎn)生沉降運動(dòng)。
③差速離心法
差速離心法主要是采取逐漸提高離心速度的方法分離樣品中不同密度的結構,如線(xiàn)粒體、葉綠體、蛋白質(zhì)等!
第一步:設置起始的離心速度較低,先讓較大的顆粒沉降到管底,小的顆粒仍然懸浮在上清液中。
第二步:收集沉淀,改用較高的離心速度離心懸浮液,將較小的顆粒沉降,以此類(lèi)推,達到分離不同大小顆粒的目的。
優(yōu)點(diǎn):樣品的處理量較大,可用于大量樣品的初分離。
缺點(diǎn):分離復雜樣品和要求分離純度較高時(shí),離心次數多,操作繁雜,由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中間損失,所以離心分辨力差。
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